牙周膜干细胞与牙周膜细胞甲状旁腺激素受体表达的比较

• 作者: 戴旭彬 戴霜叶 杨凡巧 林雪峰 欧乾民 王烟岚 王萧萧 陈天宇
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 移植 牙周膜干细胞 牙周膜细胞 甲状旁腺激素受体 成骨分化 多向分化 组织工程 牙周炎 再生医学 表面标志物 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 干细胞培养与分化
• 页码范围: 1562-1569
• 页数: 8页
• 分类号: R394.2
• 字数: 8876字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2015.10.016

摘要

背景：牙周膜干细胞是牙周膜细胞中一类具有自我更新及多向分化潜能的间充质干细胞，经诱导可分化为成骨样细胞或脂肪样细胞。关于牙周膜干细胞是否表达甲状旁腺激素受体以及受体表达量对牙周膜干细胞成骨能力的影响等，目前尚未见相关报道。目的：检测并比较牙周膜干细胞与牙周膜细胞中甲状旁腺激素受体表达的差异，并探讨甲状旁腺激素受体在成骨过程中的作用机制。方法：应用免疫磁珠法筛选分离牙周膜干细胞及牙周膜细胞。通过细胞免疫荧光染色、荧光定量PCR等方法检测并比较牙周膜干细胞与牙周膜细胞中甲状旁腺激素受体的表达差异。应用荧光定量PCR、碱性磷酸酶活性检测及矿化能力分析等方法评价甲状旁腺激素受体对两者成骨能力的影响。结果与结论：应用免疫磁珠法筛选的STRO-1阳性细胞，经细胞免疫荧光染色鉴定STRO-1、CD146、Vimentin等间充质干细胞表面表型均呈阳性，证明为牙周膜干细胞。细胞免疫荧光染色证明，牙周膜干细胞表达甲状旁腺激素受体，其主要分布于细胞膜与胞浆内，与牙周膜细胞及人成骨肉瘤MG63细胞系相似。荧光定量PCR结果表明，牙周膜干细胞甲状旁腺激素受体的表达量约为牙周膜细胞的3.7倍，与MG63细胞相近。经10-7 mol/L甲状旁腺激素处理30 min后，牙周膜干细胞的甲状旁腺激素受体表达量明显增加。经成骨诱导后，牙周膜干细胞的甲状旁腺激素受体表达量、成骨相关基因表达量、碱性磷酸酶活性及矿化能力均高于牙周膜细胞。上述实验结果证明，牙周膜干细胞能表达甲状旁腺激素受体，且主要分布于细胞膜和细胞浆内。牙周膜干细胞甲状旁腺激素受体的表达量明显高于牙周膜细胞，而且甲状旁腺激素受体表达量与细胞的成骨能力相关，说明牙周膜干细胞比牙周膜细胞具有更强的成骨能力，是口腔组织工程学中具有广阔应用前景的种子细胞。