TNFα和IL-1β靶点抗炎药物筛选细胞模型的构建

• 作者: 丁海敏 华茜 张琦 王星华 谭琰
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 肿瘤坏死因子α 白介素1β 抗炎 药物筛选 稳定转染
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1005-1009
• 分类号: Q785|R965.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2015.06.002

摘要

目的:构建两个高表达人TNFα和IL-1β细胞系,建立抗炎药物筛选细胞模型.方法:运用PCR的方法从载体pCMVSport-TNFα和pCMVSport-IL1β上扩增目的基因,以亚克隆方法将目的基因分别插入真核表达载体pcDNA3.1和pFLAG-CMV中,用单酶切、PCR扩增和基因测序的方法鉴定重组效果,然后将重组成功的质粒转入HEK293细胞系内,挑选能够稳定表达并遗传的单克隆细胞株,用蛋白免疫印迹(Western blot)法分析其表达效果.结果:三种鉴定方法均显示重组质粒构建成功.Western blot结果显示,细胞株T3、T4均能较高表达炎症因子TNF-α;细胞株I2、I3、I5均能较高表达炎症因子IL-1β.结论:成功构建了TNFα和IL-1β靶标的药物筛选细胞模型,为筛选具有抗炎作用的中药提供了一个新平台.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	华茜	北京中医药大学基础医学院	42	173	7.0	11.0
2	谭琰	北京中医药大学基础医学院	12	28	3.0	5.0
3	张琦	北京中医药大学基础医学院	15	25	3.0	4.0
4	丁海敏	北京中医药大学中药学院	4	5	2.0	2.0
5	王星华	北京中医药大学基础医学院	2	8	2.0	2.0