木薯干旱胁迫下离区发育相关基因MeAP2-2酵母单杂交文库构建及其上游调控基因的筛选

• 作者: 廖文彬 彭明 李雅韵 杨义伶 王斌
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 农学
• 关键词: 木薯离区 酵母单杂交 SMART技术 上游调控基因
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 农学·农业基础科学
• 页码范围: 119-127
• 分类号: S562.035
• 语种: 中文

摘要

为了研究干旱胁迫下调节木薯叶片脱落相关的重要节点基因及其分子调控网络,以‘华南5号’木薯为实验材料,通过采用酵母单杂交筛选系统,将MeAP2-2启动子中激素与胁迫相关的元件串联后整合入酵母染色体,构建诱饵菌株;采用SMART技术进行离区cDNA文库的构建,将离区cDNA与pGADT7-Rec表达栽体共同转化诱饵菌株,通过同源重组在酵母细胞内筛选MeAP2-2的上游转录调节因子;利用酵母菌落PCR法获得阳性克隆中的cDNA插入片段,测序后在JGI网站进行Blast分析.结果表明,构建的cDNA文库库容为1.5×106,插入片段大小为250～3000 bp.cDNA插入片段经测序和Blast 同源性分析和定量PCR分析,筛选出1个metallothionein protein,1个core histone protein,1个heavymetal-associated protein与MeAP2-2相关的调节因子.实验结果证明酵母单杂交文库构建成功,初步筛选获得了调节MeAP2-2的上游调节因子.为研究木薯干旱胁迫下离区发育的信号转导通路奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭明	中国热带农业科学院热带生物技术研究所	136	1114	16.0	25.0
2	廖文彬	中国热带农业科学院热带生物技术研究所	20	188	7.0	13.0
3	杨义伶	中国热带农业科学院热带生物技术研究所	2	5	2.0	2.0
4	李雅韵	中国热带农业科学院热带生物技术研究所	2	5	2.0	2.0
5	王斌	中国热带农业科学院热带生物技术研究所	8	16	3.0	3.0