白色念珠菌实时荧光定量聚合酶链反应检测体系的建立

• 作者: 刘华 张兵 方亦兵 朱秀娟 游亚兰 田鑫 贺湘玲 邓中平 邹惠 邹润英 钟礼立
• 来源期刊: 检验医学与临床
• 关键词: 白色念珠菌 感染 实时荧光定量聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 论 著
• 页码范围: 737-739,742
• 页数: 4页
• 字数: 3716字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-9455.2015.06.007

摘要

目的：建立白色念珠菌实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测体系，实现白色念珠菌的早期、快速检测，为临床医生对白色念珠菌感染的诊断提供指导。方法使用白色念珠菌及其他真菌标准株，利用Primer Prem‐ier 5．0和Beacon Designer 7．7设计引物探针。同时对镁离子（Mg2＋）、三磷酸脱氧核糖核苷酸（dNTP）、引物及探针浓度等参数进行优化，选出最佳反应体系，并验证反应体系的特异性、重复性，分析反应体系的最低检测限，对临床分离出的45例白色念珠菌进行检测。结果设计的引物探针仅能对白色念珠菌进行特异性扩增，反应体系不同底物浓度与Ct值之间成良好的线性关系，反应体系的最低检测限为5 CFU／mL ，且反应体系稳定性、重复性好，对临床分离菌株的检测阳性率为100％。结论成功设计了白色念珠菌特异性的引物探针，并建立了实时荧光定量PCR检测体系，能快速、准确地检出白色念珠菌。