HPLC法测定apoA-1介导的泡沫细胞胆固醇流出的实验研究

• 作者: 丁航 兰柳波 张志珍 李观强 陈小谊 马卫列 龚晓华
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 色谱法 ,高效液相 泡沫细胞 载脂蛋白A-1 胆甾烯酮 胆固醇流出
• 年，卷（期）: 2015,（29）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 4116-4119,4122
• 页数: 5页
• 分类号: Q54
• 字数: 5216字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2015.29.028

摘要

目的：建立用高效液相色谱（HPLC）法测定载脂蛋白A‐1（apoA‐1）介导的泡沫细胞内胆固醇流出率的实验方法。方法人单核细胞THP‐1用160 nmol／L佛波酯（PMA）诱导24 h分化为贴壁巨噬细胞（PMA组），再用50μg／mL乙酰化低密度脂蛋白（ac‐LDL）处理48 h ，诱导巨噬细胞变成泡沫细胞（ac‐LDL组）；加入含apoA‐1的1640培养基培养24 h（apoA‐1组）。油红O染色和HPLC法测定细胞内胆固醇水平，鉴定巨噬细胞源性泡沫细胞模型。采用 HPLC分析和液体闪烁计数法测定apoA‐1介导的泡沫细胞内胆固醇流出率。结果 T HP‐1巨噬细胞源性泡沫细胞经油红O染色后，细胞内可明显观察到大量红色脂滴存在。胆固醇水平测定显示，ac‐LDL组内游离胆固醇、总胆固醇和胆固醇酯的水平明显高于 PMA组（P＜0．01）。ac‐LDL处理细胞48 h后，ac‐LDL 组内总胆固醇水平为80．25μg／mg 细胞蛋白，胆固醇酯水平为47．65μg／mg 细胞蛋白，占总胆固醇的59．38％，与PMA组相比，差异有统计学意义（P＜0．01）。 HPLC分析和液体闪烁计数法结果表明，apoA‐1介导泡沫细胞内apoA‐1组胆固醇流出率分别为5．63％和7．08％（P＜0．01）。结论本研究成功建立了酶促反应结合 HPLC测定泡沫细胞内胆固醇流出的方法，为后续研究细胞脂质代谢提供了实验基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	丁航	广东医学院生物化学与分子生物学教研室	61	503	13.0	20.0
2	李观强	深圳市龙岗区人民医院检验科	31	193	8.0	12.0
3	马卫列	广东医学院生物化学与分子生物学教研室	22	39	4.0	5.0
4	兰柳波	广东医学院生物化学与分子生物学教研室	13	65	5.0	7.0
5	陈小谊	广东医学院生物化学与分子生物学教研室	4	13	2.0	3.0
6	龚晓华	广东医学院生物化学与分子生物学教研室	3	2	1.0	1.0