NPPB 在大鼠肝细胞分离中的应用效果及其机制

• 作者: 徐伟 李灼日 梁珊 石詠中 聂盛丹 黄韧
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 肝细胞分离 氯通道阻断剂 5-硝基-2(3-苯丙胺)-苯甲酸 氧化应激 线粒体氯通道蛋白4
• 年，卷（期）: 2015,（32）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 14-16
• 页数: 3页
• 分类号: R329
• 字数: 2485字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2015.32.005

摘要

目的：观察5-硝基-2（3-苯丙胺）-苯甲酸（ NPPB）在大鼠肝细胞分离中的应用效果，并探讨其可能的机制。方法将12只SD大鼠随机分为观察组和对照组各6只。两组分离肝细胞后，采用改良的四步胶原酶分离技术进行消化，制备肝细胞悬液。观察组在使用灌注液进行消化的过程中加入NPPB。采用血细胞计数板计算肝细胞收获量，PAS染色后计算纯度，0．4％台盼蓝染色后计算成活率。细胞无血清培养24 h后，采用全自动生化分析仪检测上层清液中的白蛋白（ ALB）、ALT。采用紫外线分光光度法检测LDH吸光度，并计算LDH释放率。采用RT-PCR法检测细胞线粒体氯通道蛋白4（ CLIC4） mRNA 表达， Western blotting 法检测细胞 CLIC4蛋白表达。结果观察组与对照组肝细胞收获量分别为（4．41±0．20）×108、（4．40±0．26）×108个，纯度分别为90％±1％、89％±2％，成活率分别为88％±2％、85％±1％；两组比较，P均＞0．05。观察组与对照组ALB分别为（43．8±5．0）、（25．2±3．0）g／L，ALT分别为（47．8±6．0）、（104．3±11．7）U／L，LDH释放率分别为21．0％±2．7％、34．0％±2．4％；两组比较，P均＜0．05。观察组与对照组CLIC4 mRNA相对表达量分别为1．01±0．02、1．62±0．01，CLIC4蛋白相对表达量分别为0．38±0．02、0．52±0．03；两组比较，P均＜0．05。结论肝细胞分离过程中应用NPPB可以在不影响分离细胞收获量、纯度及成活率的情况下，减轻肝细胞膜结构和功能损伤，其机制可能与抑制CLIC4表达有关。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李灼日		46	187	7.0	11.0
2	徐伟		10	21	3.0	4.0
3	聂盛丹		17	68	5.0	7.0
4	石詠中		12	23	3.0	4.0
5	黄韧		8	22	3.0	4.0
6	梁珊		25	50	3.0	5.0