小鼠来源的OX40融合蛋白的表达鉴定及优化表达

• 作者: 冯永堂 唐华平 杜雪梅 王晓燕 苏毅 赵蕾 鞠吉雨
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: OX40融合蛋白 pET32 a-OX40重组质粒DNA 大肠杆菌BL21 动物试验
• 年，卷（期）: 2015,（35）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 25-27,28
• 页数: 4页
• 分类号: R378.2
• 字数: 3540字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2015.35.008

摘要

目的：鉴定及优化表达小鼠来源的OX40融合蛋白。方法将已构建好的pET32a-OX40重组质粒DNA转入大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞，涂于含Amp平板筛选出阳性克隆，经Western blotting鉴定融合蛋白，对阳性克隆株通过改变异丙基硫代半乳糖苷（ IPTG）浓度、培养温度及时间条件，观察目的融合蛋白表达的变化。结果转化的质粒经Western blotting鉴定，证实有目的蛋白表达。当温度、时间不变时，IPTG分别为0．1、0．2、0．4、0．6、0．8、1．0、2．0 mmol／L，7个不同浓度实验结果以0．4 mmol／L时蛋白表达量最高。当IPTG浓度、时间不变时，在20、25、30、35、40℃不同的温度点，以30℃时蛋白表达量最高。当温度、IPTG浓度不变时，1、2、3、4、5、6 h不同时间点，以4 h时蛋白表达量最高。结论小鼠来源的OX40融合蛋白在BL21细胞获得成功表达，并获得其最佳表达条件（IPTG浓度0．4 mmol／L、温度30℃、诱导4 h）。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯永堂	潍坊医学院免疫学教研室	34	180	5.0	12.0
2	鞠吉雨	潍坊医学院免疫学教研室	39	101	5.0	8.0
3	唐华平		27	185	8.0	12.0
4	苏毅		5	31	3.0	5.0
5	杜雪梅		3	9	1.0	3.0
6	王晓燕		4	9	1.0	3.0
7	赵蕾		15	87	6.0	9.0