三向连接构造组合引物介导的滚环扩增技术检测肠道病毒71型方法的建立

• 作者: 周敏 张宏萍 李雪梅 陆仁飞
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 肠道病毒71型 恒温扩增 滚环扩增 三向连接
• 年，卷（期）: 2015,（28）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 21-23,111
• 页数: 4页
• 分类号: R446.1
• 字数: 2274字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2015.28.007

摘要

目的：建立三向连接构造（3WJ）组合引物介导的滚环扩增（ PG-RCA）技术检测肠道病毒71型（ EV71）的方法，并验证其检测效果。方法根据EV71的VP1基因保守区设计引物模板、引物以及环状探针前体，确立反应体系及反应条件，实时荧光PCR仪监测扩增结果。采用已建立的3WJ组合PG-RCA技术检测16例手足口病患儿咽拭子标本（ EV71阳性12例、柯萨奇病毒A阳性2例、柯萨奇病毒B阳性2例）。结果已建立的3 WJ组合PG-RCA技术能检测到amol级的EV71 RNA，说明方法建立成功。 EV71阳性标本扩增曲线荧光强度均超过阈值；柯萨奇病毒A、B阳性标本扩增曲线荧光强度均低于阈值。结论成功建立3WJ组合PG-RCA技术检测EV71的方法，检测效果好。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李雪梅		10	5	1.0	1.0
2	陆仁飞		13	18	3.0	3.0
3	张宏萍		10	9	2.0	3.0
4	周敏		9	6	1.0	2.0