嵌合蛋白P128的表达、纯化与抗牛源葡萄球菌活性研究

• 作者: 刘文俊 夏晓莉 孙怀昌 张鑫宇 汤明元
• 来源期刊: 扬州大学学报（农业与生命科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 嵌合蛋白P128 融合表达 纯化 抗葡萄球菌活性
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: S858.23
• 语种: 中文
• DOI: 10.16872/j.cnki.1671-4652.2016.01.001

摘要

将抗葡萄球菌嵌合蛋白P128编码序列优化成大肠埃希菌偏爱密码子序列,插入脑膜炎奈瑟氏菌FrpC蛋白自加工元件(SPM)与类弹性蛋白多肽(ELP)融合表达载体,将重组载体pP128-SPM-ELP转化大肠埃希菌进行诱导表达,利用ELP的温度敏感可逆相变循环(ITC)进行融合蛋白纯化,利用SPM自切割活性进行融合蛋白切割和目的蛋白回收;以牛源金黄葡萄球菌为指示菌,对回收的嵌合蛋白P128进行溶(杀)菌活性测定.结果表明:P128-SPM-ELP融合蛋白获得高水平、可溶性表达,经过两轮ITC获得的融合蛋白纯度大于90％,其自切割效率接近100％,回收的嵌合蛋白P128对金黄葡萄球菌的最小抑菌浓度为8.4 μg·mL-1,且有很强的杀菌作用.证明SPM-ELP融合表达与纯化系统是简单、经济、有效的重组蛋白表达与纯化系统,获得的嵌合蛋白P128可用于葡萄球菌性奶牛疾病防治.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙怀昌		138	1042	15.0	25.0
2	刘文俊		8	20	3.0	4.0
3	张鑫宇		40	142	6.0	10.0
4	夏晓莉		24	78	6.0	8.0
5	汤明元		2	0	0.0	0.0