3种分离尿外体方法比较

• 作者: 吴惠毅 朱迎星 杨晋 赵绍林 郑萍
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 外体 超速离心法 超滤法 沉淀法
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 临床检验技术研究
• 页码范围: 5-8
• 页数: 4页
• 分类号: R446
• 字数: 3306字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2016.01.02

摘要

目的 对超速离心法、超滤法和沉淀法3种分离尿液中外体(exosome)方法进行比较,为临床研究选择合适的分离方法提供依据.方法 用超速离心法、超滤法和沉淀法3种方法分别从4例健康人和2例慢性肾脏病(CKD)患者尿液中分离exosome.用透射电镜观察尿exosome形态结构,BCA法检测exosome总蛋白质浓度,分别在尿体积及exosome总蛋白质浓度相同上样条件下,用western blot(WB)检测exosome标志蛋白TSG101和Alix.结果 3种分离方法均能获得直径为40 ～ 100 nm的圆形膜性囊泡;WB能检测到超速离心法及超滤法分离得到的exosome标志蛋白,而沉淀法未检测到;超滤法尿exosome总蛋白质浓度远高于超速离心法及沉淀法;超速离心法尿体积及exosome总蛋白质浓度相同情况下上样时所有样本均能检测到exosome标志蛋白,且表达量在3种方法中均最多;超滤法尿体积相同情况下上样,4例健康人均能检测到exosome标志蛋白,而以exosome总蛋白质浓度相同上样时,仅有2例健康人能检测到标志蛋白,但2例CKD患者在此两种上样方式未检测到标志蛋白;沉淀法两种上样条件下所有样本均未检测到exosome标志蛋白.结论 超速离心法分离尿exosome效果较好,开展尿exosome临床研究时建议选择超速离心法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴惠毅	连云港市第一人民医院检验科	40	205	9.0	12.0
2	杨晋	连云港市第一人民医院检验科	45	210	9.0	12.0
3	赵绍林	连云港市第一人民医院检验科	34	147	7.0	9.0
4	郑萍	连云港市第一人民医院检验科	19	92	6.0	8.0
5	朱迎星	江苏大学医学院	1	2	1.0	1.0