利用 TALEN 技术建立恒河猴 TRIM5α基因 突变细胞株

• 作者: 余庆 曾毅 李东升 王小莉 腾智平 袁雅红
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: TRIM5α TALEN 恒河猴 点突变
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 53-57
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.12.010

摘要

利用 TALEN 技术建立恒河猴 TRIM5α基因突变细胞株，为进一步研究 TRIM5α基因的功能奠定基础。构建针对TRIM5α打靶基因的 TALEN，通过点突变的方法获得包含 TRIM5α第7个外显子中打靶位点1211-1224的基因序列并构建点突变donor 载体。将打靶 TRIM5α基因的 TALEN 质粒和 donor 质粒电转入恒河猴肾细胞（LLC-MK2）中，无限稀释法获得单克隆细胞系，通过抽提基因组 DNA，再利用 PCR 技术扩增目标序列并测序筛选出 TRIM5α碱基缺失（1215-1216）和点突变（1213-1215，1217）的细胞系。通过共转 TALEN 质粒和点突变的 donor 质粒筛选获得了 TRIM5α基因敲除和 TRIM5α基因点突变的 LLC-MK2细胞系。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李东升	湖北医药学院附属太和医院生命科学研究所	36	109	5.0	8.0
2	袁雅红	北京工业大学生命科学与生物工程学院	18	80	4.0	8.0
4	王小莉	北京工业大学生命科学与生物工程学院	14	24	3.0	3.0
6	余庆	湖北医药学院附属太和医院生命科学研究所	3	2	1.0	1.0
11	腾智平	中国预防医学科学院病毒所	2	2	1.0	1.0