RC-3产硫酸软骨素酶的条件优化及酶的分离纯化

• 作者: 王莹 郭云瑕 高蒙初
• 来源期刊: 食品科技
• 学科: 工学
• 关键词: RC-3菌株 硫酸软骨素酶 条件优化 分离纯化 PAGE
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 生物工程篇
• 页码范围: 7-12
• 页数: 6页
• 分类号: TS201.2+5
• 语种: 中文

摘要

研究了菌株RC-3产硫酸软骨素酶的最适发酵条件及酶的分离纯化,分别优化了碳源种类、碳源浓度、氮源种类、氮源浓度和NaCl浓度等条件,在最适发酵条件下对RC-3进行发酵培养,收集菌体进行细胞破碎制备粗酶液.粗酶液依次经过Q-Sepharose Fast Flow(QFF)阴离子交换层析与Sephacryl S-1000凝胶过滤层析和高效液相色谱(HPLC)进行逐级分离纯化,并利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的方法验证纯化酶活力.结果表明,最优碳源为0.5％的岩藻多糖(Fucoidan)加乳糖、最优氮源为1.0％的牛肉膏、NaCl的最优浓度为0.3％,在上述条件下发酵48h,获得的菌体生物量最高,酶活力较优化前提高3倍,达1066.89 U/mL.粗酶经过QFF离子交换层析和Sephacryl S-1000葡聚糖凝胶纯化后获得相对较纯的酶,该酶经过HPLC检测表明主要有2个峰,并用聚丙烯酰胺凝胶电泳证实了此二峰均具有酶活力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王莹		48	234	10.0	13.0
2	郭云瑕		4	10	1.0	3.0
3	高蒙初		1	0	0.0	0.0