HIV-1型gp41抗原蛋白在大肠杆菌无细胞体系中的表达和免疫反应性检测

• 作者: 徐志南 来力 杨修亮 盛嘉元 蔡谨 黄磊
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 人类免疫缺陷病毒 跨膜蛋白gp41 无细胞体系 去污剂 亲和层析 乳胶免疫层析 试纸 免疫反应性
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 7-11
• 页数: 5页
• 分类号: Q81
• 语种: 中文

摘要

HIV-1型gp41抗原蛋白在HIV初筛诊断中有重要应用.该研究合成了gp41全长基因序列,将其与pIVEX2.4c酶切连接构建表达载体,在大肠杆菌无细胞体系中实现了目标蛋白的全长可溶表达.考察了添加不同浓度非离子型去污剂Brij78对蛋白可溶性的影响,在0.2％ Brij78条件下,可溶性gp41重组蛋白的表达水平达到650μg/mL.Ni2亲和层析纯化目标蛋白,纯度达到95.6％;超滤浓缩后,蛋白浓度为0.9 mg/mL,总回收率为70.8％.免疫反应性检测结果显示该gp41重组抗原制备的乳胶HIV抗体诊断试纸能与不同滴度的HIV-1型阳性标本反应,在检测线位置出现红色条带,而与HIV-1型阴性标本无反应.该研究制备了具有完整氨基酸序列的HIV-1型gp41重组抗原,为进一步提高HIV抗体诊断试剂的质量打下了基础.