焦磷酸测序法检测OCT4启动子在大鼠骨髓源性肝干细胞分化中的甲基化变化

• 作者: 利民 廖彩仙 张梓朗 张茂 潘润华 阿斯楞
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 大鼠骨髓源性肝干细胞 OCT4 启动子甲基化 焦磷酸测序
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 113-118
• 页数: 6页
• 分类号: Q344
• 语种: 中文
• DOI: 10.16605/j.cnki.1007-7847.2016.02.004

摘要

骨髓间充质干细胞具有分化成为肝细胞的潜能已得到证实,但其分化的调控机理还不完全清楚.通过检测大鼠骨髓源性肝干细胞(rat bone marrow-derived liver stem cells,RBMLSCs)诱导分化为肝细胞过程中OCT4启动子甲基化的变化,来探讨启动子甲基化调控细胞分化的机制.RBMLSCs用25 μg/L重组人肝细胞生长因子和0.1 nmol/L地塞米松进行诱导,在诱导之后不同时间点(0d,7d,14d)提取细胞的DNA及RNA.用荧光定量PCR法检测白蛋白(albumin,Alb)和OCT4的mRNA表达水平,应用焦磷酸测序法定量检测OCT4基因的启动子中4个CpG位点的甲基化变化.结果表明:在RBMLSCs分化过程中,Alb mRNA持续增高(P＜0.05),但OCT4 mRNA表达在7d及14d明显减少(P＜0.005);同时OCT4启动子上游的CpG1-2-3甲基化频率显著上升(P＜0.001),但CpG4甲基化无明显变化.这些结果说明OCT4启动子高甲基化可能导致其mRNA表达减少,RBMLSCs多能性消失,但CpG4并不参与这一分化调控过程.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	廖彩仙		49	256	9.0	13.0
2	利民		13	54	4.0	6.0
3	潘润华		5	16	3.0	4.0
4	阿斯楞		3	10	2.0	3.0
5	张茂		2	3	1.0	1.0
6	张梓朗		3	3	1.0	1.0