嗜水气单胞菌ATCC7966luxS基因缺失株构建及特性研究

• 作者: 崔一 张福蓉 权春善 范圣第 赵晶 郭婉萍 陈明
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 嗜水气单胞菌 luxS AI-2 胞外蛋白酶 生物膜
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 462-468
• 页数: 7页
• 分类号: R378
• 字数: 4425字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2016.05.009

摘要

目的 研究群体感应信号分子AI-2合成酶编码基因luxS对嗜水气单胞菌ATCC 7966生理特性及毒力因子的影响.方法 利用同源重组原理,构建含有中间为卡那霉素抗性基因,两侧为luxS基因上、下游同源序列片段的基因敲除质粒,将构建好的质粒转化大肠埃希氏菌SM 10(λpir)感受态细胞,利用接合法将质粒转入嗜水气单胞菌ATCC 7966,通过抗性筛选、PCR和DNA测序确认嗜水气单胞菌luxS基因缺失突变株.比较野生株ATCC 7966和luxS基因缺失突变株生长速度、AI-2合成、胞外蛋白酶合成及生物膜形成的差异.结果 嗜水气单胞菌luxS基因缺失突变株△luxS构建成功.与野生株相比,突变株生长周期延长,基本丧失合成AI-2和胞外蛋白酶的能力;突变株生物膜形成能力降低,生长24 h时生物膜形成能力为野生株的14.5％,36 h时生物膜形成能力为野生株的60.0％,突变株生物膜形成速度明显比野生株缓慢,结构更为疏松.结论 luxS基因参与调控嗜水气单胞菌的生长、AI-2合成和毒力因子表达,本研究为进一步研究luxS基因在嗜水气单胞菌致病性中发挥的作用奠定基础.