CLU基因干扰质粒的构建及其对鼻咽癌细胞生物学功能的影响

• 作者: 卢金平 李跃进 王巍巍
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: 鼻咽癌 丛生蛋白 肿瘤转移
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 442-447
• 分类号: R739.63
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2016.06.002

摘要

目的 构建CLU基因干扰重组质粒及建立CLU基因干扰转染鼻咽癌细胞及动物模型,检测CLU对鼻咽癌细胞生物学功能的影响.方法 首先以real-time PCR和Western blot法验证CLU在鼻咽癌细胞系5-8F,6-10B中的表达,以高表达CLU的5-8F细胞作为干扰转染的目标细胞;设计及构建shRNA表达载体pSR-GFP/Neo-CLU-shRNA,将其转染至5-8F鼻咽癌细胞系中,通过Transwell小室迁移及侵袭实验来检测对其迁移和侵袭功能的影响.结果 与6-10B细胞比较,CLU基因在5-8F中的表达显著上调(P＜0.05);干扰鼻咽癌细胞5-8F中的CLU可使细胞迁移和侵袭功能明显减弱(P＜0.05),使其体外成瘤能力显著降低(P＜0.05).结论 CLU基因在鼻咽癌细胞系5-8F中明显高表达;pSR-GFP/Neo-CLU-shRNA可成功干扰5-8F中CLU的表达;CLU可抑制5-8F细胞的迁移、侵袭及体内成瘤能力.