仙茅根茎DNA的提取及其ISSR-PCR反应体系的优化

• 作者: 何钢 刘贤桂 张吉顺 文梦维 朱丽芳 梁文斌 荣广天
• 来源期刊: 经济林研究
• 学科: 农学
• 关键词: 仙茅 根茎 DNA提取 ISSR 反应体系
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 33-39,44
• 分类号: S603.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.14067/j.cnki.1003-8981.2016.01.006

摘要

为了改进仙茅基因组DNA的提取方法,从而为其遗传多样性研究提供参考依据,以仙茅根茎为材料,采用CTAB法探讨了仙茅根茎DNA大量提取中CTAB浓度、PVP用量及NaCl浓度对其DNA质量的影响情况.结果表明,仙茅根茎DNA的大量提取方法的最优组合为:CTAB的浓度为2％,PVP的加入量为0.20 g,NaCl的浓度为4 mol/L.为了得到仙茅的最佳ISSR-PCR反应体系,以(CT)8RG为引物,采用单因素实验与正交实验相结合的方法,得到的最优反应体系(25 μL)为:1×PCR Buffer,模板DNA浓度为50 ng,Mg2+浓度为2.50 mmol/L,dNTPs浓度为0.20 mmol/L,引物浓度为0.40 μmol/L,Taq DNA聚合酶浓度为1.50 U.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁文斌	中南林业科技大学生命科学与技术学院	57	680	15.0	22.0
2	何钢	中南林业科技大学生命科学与技术学院	65	568	14.0	20.0
3	刘贤桂	中南林业科技大学生命科学与技术学院	23	116	6.0	10.0
4	朱丽芳	中南林业科技大学生命科学与技术学院	5	30	4.0	5.0
5	张吉顺	中南林业科技大学生命科学与技术学院	1	9	1.0	1.0
6	荣广天	中南林业科技大学生命科学与技术学院	6	37	4.0	6.0
7	文梦维	中南林业科技大学生命科学与技术学院	2	14	2.0	2.0