叶酸受体α原核载体的构建及表达

• 作者: 张娟 张梅 强旭 王旻 邢黎军 邱郑
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 叶酸受体α 构建 原核表达 蛋白鉴定 亲和力 构象
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 26-29
• 页数: 4页
• 分类号: Q51|Q78
• 语种: 中文

摘要

PCR法扩增叶酸受体α基因片段,经Nco Ⅰ和EcoRⅠ双酶切后克隆到原核表达载体pet22b,并进行双酶切和测序鉴定;将测序正确的重组质粒通过CaCl2法转入BL21(DE3)表达菌株,IPTG诱导蛋白表达,镍柱亲和纯化,通过SDS-PAGE,Western blot和ELISA鉴定蛋白表达;免疫小鼠,血清效价检测蛋白免疫原性.经双酶切和测序验证,成功构建FRα-pet22b表达载体.Western blot验证表明,叶酸受体α基因能在BL21中表达目的蛋白,但ELISA值较低.经免疫后小鼠血清与市售叶酸受体α亲和力差,预示原核表达虽能得到叶酸受体α,但其构象可能与真核表达蛋白不同.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王旻		170	1536	20.0	32.0
2	张娟		44	98	6.0	9.0
3	邱郑		6	6	2.0	2.0
4	邢黎军		3	0	0.0	0.0
5	张梅		3	1	1.0	1.0
6	强旭		1	0	0.0	0.0