水稻白叶枯病菌 c-di-GMP 受体 Clpxoo 关键结合功能位点的确定

• 作者: 何晨阳 李建宇 李波 杨凤环 田芳 陈华民
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 水稻白叶枯病菌 c-di-GMP 信号受体蛋白 点突变体 结合作用
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 124-129
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.12.020

摘要

旨在确定水稻白叶枯病菌（Xanthomonasoryzaepv.oryzae，Xoo）c-di-GMP 信号受体 Clpxoo 的关键功能位点。通过对 Clpxoo 蛋白氨基酸位点基因突变，表达载体构建、蛋白诱导表达及其 Ni-NTAResin 亲和层析，进行了 Clpxoo及其点突变蛋白的原核表达和产物纯化；通过等温滴定量热法（ITC），检测了 Clpxoo及其点突变蛋白与 c-di-GMP 的结合作用。利用基因定点突变和桥接 PCR 方法，在优化的诱导表达和纯化条件下，成功地获得了 Clpxoo 点突变蛋白和与 c-di-GMP 不发生结合的 Clpxoo 点突变体。结果表明，Clpxoo 蛋白第70位天冬氨酸和第99位谷氨酸是与 c-di-GMP 结合的关键功能位点。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈华民	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	27	104	5.0	7.0
2	何晨阳	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	41	269	10.0	13.0
3	李波	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	16	206	9.0	14.0
4	李建宇	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	1	2	1.0	1.0
5	杨凤环	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	5	11	3.0	3.0