应用Taqman探针实时荧光定量PCR技术检测烟草靶斑病菌Rhizoctonia solani AG-3方法的建立

• 作者: 吴元华 安梦楠 赵秀香 赵艳琴 陈建光
• 来源期刊: 中国烟草学报
• 关键词: 烟草靶斑病菌 AG-3 实时荧光定量PCR 烟草
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 101-107
• 页数: 7页
• 字数: 5802字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16472/j.chinatobacco.2015.196

摘要

分别基于7个烟草靶斑病菌株基因组中ITS-5.8S rDNA序列设计引物和探针;并对引物及探针特异性进行验证;建立检测体系并对接种烟草靶斑病菌的叶片和土壤中的烟草靶斑病菌进行检测.结果表明:所设计的引物及探针对R.solani AG-3具有特异性,检测体系可以检测出烟草叶片及土壤样品中的烟草靶斑病菌.接种烟草叶片的检测表明,接种后6h就可检测到强致病力菌株YC-9,12h后能检测到弱致病力菌株LF-2;获得了烟草靶斑病菌DNA质量的对数与添加菌丝量的对数之间的回归曲线方程,对不同月份土壤样品的测定结果表明烟草靶斑病菌在土壤中呈周年动态变化趋势.