内含肽融合标签介导的人乙醛脱氢酶2基因原核表达

• 作者: 刘向宇 尹杰超 李景鹏
• 来源期刊: 东北农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 人乙醛脱氢酶2 内含肽 重组表达 包涵体 IMPACTTM-CN蛋白纯化系统
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 38-44
• 页数: 7页
• 分类号: Q78
• 字数: 4755字
• 语种: 中文

摘要

为获得高活性重组人乙醛脱氢酶2(ALDH2)重组蛋白,研究通过PCR获得ALDH2基因,先后构建克隆和表达载体pGEM-ALDH2和pTYB11-ALDH2.转化的阳性重组菌经IPTG诱导,SDS-PAGE显示融合蛋白获得大量表达.通过正交试验对表达条件优化设计,结果表明,诱导OD值0.3,30℃,IPTG浓度1.0 mmol·L-1,诱导表达4 h为最优表达条件.由于融合蛋白以包涵体形式存在,经变性、复性,使用IMPACTTM-CN蛋白纯化系统,经内含肽标签蛋白自裂解洗脱、纯化,获得仅含有几个载体氨基酸的ALDH2蛋白,蛋白浓度为0.045 mg·mL-1.纯化的ALDH2蛋白比活力为462 U·mg-1.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李景鹏	东北农业大学生命科学学院	96	990	17.0	28.0
2	尹杰超	东北农业大学生命科学学院	20	106	4.0	10.0
3	刘向宇	东北农业大学生命科学学院	7	13	2.0	3.0