纤维二糖差向异构酶在毕赤酵母中的表达及酶学性质研究

• 作者: 华霄 张文斌 杨瑞金 沈秋云 赵伟 韩亮
• 来源期刊: 工业微生物
• 关键词: 纤维二糖差向异构酶 毕赤酵母 性质
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 研究与应用
• 页码范围: 16-21
• 页数: 6页
• 字数: 3334字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2016.01.003

摘要

首先将来源于Caldicellulosiruptor saccharolyticus的纤维二糖差向异构酶基因CsCEm进行密码子优化,然后进行全基因合成,再将其引入到载体pPIC9K中,构建重组质粒pPIC9K-CsCEm并转化入毕赤酵母GS115,得到酵母工程菌株.经微孔板筛选、摇瓶筛选得到酶活最高的重组工程茵GS115-4-19.该菌株经甲醇诱导144 h后,摇瓶发酵液上清酶活达到0.42 U/mL.酶学性质研究结果表明:该酶的最适pH为7.5,且在pH 6.0 ～8.0范围内相对酶活都在80％以上;在pH 4～9的缓冲液中放置24 h后仍保持原酶活力的80％以上;最适温度为80℃,在60℃～80℃保温30 min后,相对酶活在80％以上.动力学研究结果表明该酶对底物乳糖的Km和Vmax分别为(120.27±9.96) mmol/L和(1.035±0.05) mmol/L/min.纤维二糖差向异构酶在毕赤酵母中的成功表达为生物酶法合成乳果糖提供了重要参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨瑞金	江南大学食品学院	170	1963	23.0	35.0
5	赵伟	江南大学食品学院	110	688	15.0	20.0
6	华霄	江南大学食品学院	67	411	11.0	16.0
7	张文斌	江南大学食品学院	87	710	15.0	21.0
8	韩亮	江南大学食品学院	4	33	4.0	4.0
9	沈秋云	江南大学食品学院	2	5	1.0	2.0