酶法转化柚皮苷产普鲁宁工艺研究

• 作者: 倪辉 李利君 杨秋明 王之路 肖安风 蔡慧农
• 来源期刊: 中国食品学报
• 关键词: 柚皮苷 普鲁宁 柚苷酶 生物转化
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 应用技术
• 页码范围: 68-75
• 语种: 中文
• DOI: 10.16429/j.1009-7848.2016.05.010

摘要

优化柚苷酶转化柚皮苷生成普鲁宁的工艺,在此基础上分离纯化得到浓度较高的普鲁宁.利用碱性缓冲液处理柚苷酶,使其β-葡萄糖苷酶的活力大部分丧失,而保留α-鼠李糖苷酶的活性,从而使酶水解柚皮苷的产物——普鲁宁得到积累.利用水解过程中还原糖生成量与普鲁宁生成量成正比的关系,用DNS法检测柚皮苷水解过程中还原糖的含量,分析不同工艺参数中普鲁宁的含量.通过对柚皮苷水解过程的动态分析,得到柚苷酶转化柚皮苷的最适条件:温度50℃,pH 4.0,酶用量10 U/mL,底物含量0.16％.在此条件下酶解90 min,普鲁宁还保持较高的浓度而柚皮苷基本转化完全.酶解液经化学萃取和硅胶柱层析,得到纯化的普鲁宁,用高效液相色谱检测,其纯度达到99％.