应用FLIVO探测顺铂引起的多器官细胞凋亡

• 作者: Richard Salvi 丁大连 付勇 李永奇 杨琨 蒋海燕
• 来源期刊: 中华耳科学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 顺铂 耳毒性 神经毒性 肾毒性 肝毒性
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 104-110
• 页数: 7页
• 分类号: R916.696
• 字数: 5900字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-2922.2016.01.023

摘要

顺铂是一种用于治疗恶性肿瘤的有效铂类化疗药物。然而顺铂对机体许多组织器官，如肾脏、肝脏、神经系统以及内耳等都具有毒性损害作用。FLIVO是一种能够穿越机体组织屏障进入到机体每个细胞并用荧光标记处于凋亡活动状态半胱天冬酶的亲脂性注射用示踪剂。本研究应用袢利尿剂（利尿酸钠，40mg/kg, I.V.）暂时性破坏南美栗鼠的血-迷路屏障，促使顺铂（0.8 mg/kg, I.P.）经蜗管外壁屏障消除处进入耳蜗从而引起耳蜗毛细胞凋亡。受试南美栗鼠在联合应用利尿酸钠和顺铂后6小时和18小时终止实验。为了检测顺铂引起的发生在耳蜗和中枢以及肝肾等器官的细胞凋亡，在终止实验前经颈静脉注入100μlFLIVO探测液体并使之随着血液循环60分钟以探测出现在全身各个脏器的凋亡细胞。终止实验时，对麻醉动物常规施行心脏灌流磷酸盐缓冲液5分钟，再经心脏灌流10%福尔马林磷酸盐固定液，然后分别取出耳蜗、耳蜗核、听皮层、海马以及肝肾组织并浸入上述固定液继续固定6小时。在解剖显微镜下分离取出全耳蜗基底膜并制备成全耳蜗基底膜铺片，耳蜗核、听皮层、海马、肝脏和肾脏则常规制备成冰冻切片。在共聚焦显微镜下，观察FLIVO在上述各个器官标记出的凋亡细胞。在正常南美栗鼠各个组织器官中，均未发现FLI?VO标记的凋亡信号；在用药后6小时，仅在耳蜗外毛细胞及肾组织中检测出凋亡细胞，但在其它器官也未发现FLIVO标记的凋亡细胞；与用药后6小时相比，在用药后18小时，所有的耳蜗外毛细胞和耳蜗底回大部分内毛细胞都呈现出荧光标记的凋亡信号，出乎意料的是，尽管耳蜗腹侧核神经元出现了大量凋亡神经元，但耳蜗背侧核的神经元却未检测到明显的凋亡信号；值得注意的是，凋亡信号还出现在更为核心的中枢海马神经元和听皮层神经元。此外，肾脏组织和肝脏组织在用药后18小时也出现大量的凋亡细胞。这些结果表明，联合应用利尿酸钠和顺铂不仅导致大量耳蜗毛细胞凋亡，而且顺铂的神经毒性作用还造成了耳蜗腹侧核大量神经元的凋亡和耳蜗背侧核和海马及听皮层的部分神经元凋亡，顺铂同样导致大量的肾脏细胞和肝脏细胞凋亡，出现在上述各个脏器的细胞凋亡现象与顺铂的耳毒性作用、神经毒性作用、肾毒性作用及肝毒性作用完全一致。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李永奇	中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科	29	147	6.0	10.0
2	杨琨	武汉大学人民医院耳鼻咽喉头颈外科	47	230	7.0	14.0
3	付勇	浙江大学医学院附属儿童医院耳鼻咽喉头颈外科	29	171	7.0	11.0