转氨酶的固定化及酶学性质研究

• 作者: 朱文渊 朱芳莹 柳志强 田宋奎 董正伟
• 来源期刊: 发酵科技通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 转氨酶 固定化 磷酸吡哆醛 比酶活 酶学性质
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 81-87
• 页数: 7页
• 分类号: Q814
• 字数: 4811字
• 语种: 中文

摘要

利用环氧树脂载体进行固定化转氨酶的研究,通过单因素优化确定了较优的酶固定化条件:ES-103b树脂载体、转氨酶和辅酶磷酸吡哆醛最佳质量比为50:6:5,在pH为7.0的1mol/L磷酸钾缓冲液介质中吸附25 h.将得到的固定化颗粒重新置于pH为9.0的100 mmol/L磷酸钾缓冲液中,30℃保温30 h.取出后置于pH为8.5的3 mol/L甘氨酸-NaOH缓冲液中,25 ℃保温12h,制得固定化转氨酶,其比活力为52.7 U/g(湿载体),酶活回收率达到49.3％.酶学性质研究表明:固定化转氨酶催化反应最适pH、温度分别为7.0、50℃;固定化酶热稳定性及pH稳定性明显提高,50℃条件下的半衰期为20.2 d;在pH 8.0的三乙醇胺缓冲液中(4℃),10 d后酶活仍保持初始酶活的82.3％.