牙鲆kiss2基因的分子鉴定及表达分析

• 作者: 于善坤 付元帅 张俊玲 张红梅 施志仪
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牙鲆 kiss2 组织分布 发育表达
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医?水产养殖
• 页码范围: 176-183
• 页数: 8页
• 分类号: S917
• 字数: 4477字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2016.01.027

摘要

为克隆与牙鲆生殖相关的神经内分泌因子kiss2基因，并检测该基因在牙鲆成体不同组织及早期不同发育阶段的表达变化，本研究采用Trizol 法提取牙鲆成鱼各组织及早期不同发育阶段样品总 RNA；参照其他物种的kiss2 cDNA序列，设计并合成kiss2引物进行PCR扩增；运用实时荧光定量PCR检测kiss2基因在牙鲆成鱼各组织及早期不同发育阶段的表达情况。结果成功地获得长度为449 bp的牙鲆 kiss2 cDNA序列，其中编码区序列为366 bp，编码121个氨基酸。在该序列中发现了高度保守的“FNYNPLTLRF”序列，此序列可以调节促性腺激素释放激素和黄体生成素的合成与释放。定量PCR结果显示，牙鲆kiss2基因在脑组织中的表达量最高，在卵巢和精巢中也均有表达；牙鲆 kiss2基因在胚胎阶段表达量相对较低，而在孵化后第7 d其表达量显著增高，且在孵化后的第29 d达到高峰。说明牙鲆 kiss2基因具有明显的时期和组织差异性表达，其在牙鲆脑中的丰富表达及在精巢和卵巢中的表达表明该基因可能在牙鲆神经系统与生殖中发挥重要作用。