克氏原螯虾病原弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及其药敏与黏附特性

• 作者: 周昊 孔令严 曹际 李槿年 王蒙蒙 相翊卿 肖宁
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 克氏原螯虾 弗氏柠檬酸杆菌 鉴定 药敏性 黏附性
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 页码范围: 946-955
• 分类号: S941.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20150910088

摘要

为了明确安徽省当涂县淡水养殖克氏原螯虾暴发性疾病的病原,取濒临死亡的病虾分离病原.从肝胰腺中分离到一株优势细菌(命名为XLX1分离株),人工感染试验证实其具有较强的致病性;采用形态学检查、生理生化特性测定和细菌16S rRNA基因序列分析,确定XLX1分离株为弗氏柠檬酸杆菌.进一步对XLX1分离株进行药物敏感性、携带黏附素基因情况和细胞黏附性进行检测.结果显示:该分离株对头孢噻肟、庆大霉素、阿米卡星、硫酸新霉素、恩诺沙星、诺氟沙星、替考拉宁和米诺环素敏感或中敏,对其他7种测试药物呈现耐药.该分离株携带黏附素基因cfa和ure基因簇;序列分析发现ureABC结构基因和ureD关键辅助基因高度保守,在虾源分离株与人源参考株间前者的核苷酸和氨基酸序列同源性分别在93.2％～98.3％和91.7％～97.4％,后者的核苷酸和氨基酸序列同源性分别在90.8％～98.3％和94.7％～98.7％;与人源参考株相比,虾源分离株UreABC结构蛋白中第294、600和608位氨基酸,以及UreD蛋白中的第62和122位氨基酸发生了有意突变.XLX1分离株可以聚集方式黏附于EPC细胞周围,平均黏附菌数为29.8±5.3,但随黏附时间延长,EPC细胞出现病变.上述研究结果可为防控弗氏柠檬酸杆菌引起的水产动物疾病提供理论依据.