RNA干扰Dnmt1和Dnmt3b对小鼠胚胎成纤维细胞凋亡和基因组DNA甲基化水平的影响

• 作者: 于孟飞 吴梦华 张宇 易建明 王巨龙
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: DNA甲基转移酶1 DNA甲基转移酶3b DNA甲基化 RNA干扰 小鼠胚胎成纤维细胞
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1-7
• 页数: 7页
• 分类号: Q255
• 语种: 中文
• DOI: 10.16605/j.cnki.1007-7847.2016.01.001

摘要

DNA甲基转移酶1(DNMT1)负责DNA甲基化维持,DNA甲基转移酶3b (DNMT3b)主要负责DNA从头甲基化,在体细胞中同时干扰Dnmt1、Dnmt3b表达会给细胞带来何种影响还未见报道.实验以小鼠胚胎成纤维细胞为实验对象,用RNA干扰方法对Dnmt1和Dnmt3b进行敲低,研究分别干扰和同时干扰这两个基因对小鼠胚胎成纤维细胞凋亡、基因组甲基化水平的影响.研究发现,siRNA转染后24h,Dnmt3b干扰组和Dnmt+Dnmt3b同时干扰组细胞的增殖细胞核抗原(PCNA)Mrna水平显著降低(P＜0.05);转染后48 h,Dnmt3b单独干扰组、Dnmt1+ Dnmt3b同时干扰组中细胞凋亡显著增加(P＜0.05);Dnmt3b单独干扰组细胞基因组甲基化水平下降32％ (P＜0.01),Dnmt +Dnmt3b同时干扰组细胞的基因组甲基化水平下降约44％ (P＜0.01).结果表明,DNMT3b在小鼠胚胎成纤维细胞正常增殖、基因组甲基化水平的维持上具有重要作用.