番木瓜诱导型基因CpPGIP2启动子的克隆与分析

• 作者: 戴志林 申艳红 陈晓静
• 来源期刊: 果树学报
• 学科: 农学
• 关键词: 番木瓜 多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白 启动子 调控元件 载体构建
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 种质资源·遗传育种·分子生物学
• 页码范围: 156-163
• 页数: 8页
• 分类号: S667.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.13925/j.cnki.gsxb.20150180

摘要

[目的]获得诱导型基因CpPGIP2启动子,并分析该启动子的功能.[方法]以番木瓜CpPGIP2基因cDNA序列(HQ660394)搜索番木瓜基因组DNA序列,获得一段约2 000 bp的5’端上游DNA序列(ABIM01005077),参照该序列设计PCR特异引物,以番木瓜叶片DNA为模板克隆该启动子,并进行生物信息学分析.将3个启动子片段替换pCAM-BIA1301载体中的CaMV 35S启动子,构建缺失启动子表达载体,以GUS瞬时表达检测缺失启动子表达活性.[结果]获得了CpPGIP2起始密码子上游长为1 981 bp的调控序列,经分析该序列含有真菌、脱落酸、赤霉素、光照等多种响应元件,为诱导型启动子.构建了1个启动子全长表达载体和2个5’端缺失启动子表达载体,分别命名为pD0-1981、pD1-1204和pD2-261.启动子在番木瓜果肉中的瞬时表达显示,长度为1 204 bp的启动子表达活性最强.并且,该启动子在根、茎、叶、果肉和愈伤组织中均有不同程度的表达,在近外果皮的果肉处和根部表达最明显.[结论]本研究获得了CpPGIP2启动子序列,确定了表达活性最强的启动子长度,初步分析了启动子的表达模式和顺式作用元件,为进一步深入研究CpPGIP2基因功能以及将该启动子应用于植物基因工程育种奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈晓静		50	367	11.0	17.0
2	申艳红		28	137	7.0	10.0
3	戴志林		1	0	0.0	0.0