GPX1过表达对肺癌BERP35T1细胞DNA氧化损伤和恶性表型的影响

• 作者: 佟鹏 张伟 王春燕 苟巧 邵帅 魏志权 齐雪松
• 来源期刊: 癌变·畸变·突变
• 学科: 医学
• 关键词: 谷胱甘肽过氧化物酶1 α粒子 肺癌 氧化损伤
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 8-13,18
• 页数: 7页
• 分类号: R994.6
• 字数: 5443字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-616x.2016.01.002

摘要

目的:探讨谷胱甘肽过氧化物酶1(GPX1)过表达对α粒子辐射致肺癌BERP35T1细胞DNA氧化损伤和恶性表型的影响.方法:构建pEGFP-GPX1真核表达载体,经PCR、双酶切和测序鉴定后,采用脂质体法将重组质粒及其对照空载体分别转染至BERP35T1细胞中,筛选出具有G418抗性的细胞株,经Western blot法测定GPX1蛋白在细胞株中的表达情况;通过免疫细胞化学法、四甲基噻唑蓝(MTT)法、划痕愈合试验和锚着独立生长试验分别检测GPX1过表达对BERP35T1细胞内DNA氧化损伤产物8-羟化脱氧鸟苷(8-OHdG)水平,细胞增殖、迁移以及锚着独立生长能力的影响.结果:pEGFP-GPX1经PCR、双酶切鉴定和DNA测序证实,GPX1片段的序列完全正确;并获得GPX1稳定表达BERP35T1细胞株BERP35T1-GPX1-6,其GPX1蛋白水平是对照空载体转染细胞的4.01倍(P＜0.05);与BERP35T1细胞和对照空载体转染细胞相比,BERP35T1-GPX1-6细胞内8-OHdG水平降低,细胞的增殖、迁移和锚着独立生长能力均减弱(P＜0.05).结论:过表达GPX1可能通过清除细胞内活性氧降低DNA氧化损伤水平,从而抑制BERP35T1细胞增殖、迁移和锚着独立生长能力等恶性表型.