百草枯诱导AML12细胞凋亡过程中线粒体活性氧的作用

• 作者: 于卫华 刘江正 孔德钦 张晓迪 张涛 柏桦 海春旭 王欣 龙子
• 来源期刊: 癌变·畸变·突变
• 学科: 医学
• 关键词: 百草枯 活性氧 线粒体活性氧 线粒体膜电位 凋亡
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-7
• 页数: 7页
• 分类号: R994.6
• 字数: 4146字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-616x.2016.01.001

摘要

目的:探讨百草枯诱导小鼠肝细胞系AML12细胞凋亡过程中线粒体活性氧的作用.方法:AML12细胞分别给予o、25、50、100、200、300 μmol/L的百草枯处理.采用四甲基噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力;AnnexinV/PI双染法结合流式细胞术检测细胞凋亡率;DCFH-DA荧光探针经流式细胞仪测定细胞内活性氧水平;MitoSOX荧光探针检测线粒体活性氧变化;激光共聚焦测定JC-1探针荧光强度以检测线粒体膜电位变化.结果:与对照组比较,25～300 μmol/L的百草枯处理后可以诱导AML12细胞活力下降,且具有剂量效应关系(r=-0.94,P＜0.01);300 μmol/L的百草枯作用24h可明显诱导AML12细胞发生凋亡(P＜0.05);25～300μmol/L百草枯处理24h后细胞内活性氧依次增加(P＜0.05),25～100 μmol/L百草枯作用24 h时线粒体活性氧增加且呈剂量效应关系(r=0.98,P＜0.05),而200和300 μmol/L的百草枯作用24h时线粒体活性氧水平降低(P＜0.05).细胞活力下降与细胞内活性氧升高呈负相关(r=-0.90,P＜0.05);晚期凋亡细胞的比例与细胞内活性氧呈正相关(r=0.96,P＜0.01);JC-1检测线粒体膜电位结果显示,与对照组相比,300 μmol/L的百草枯处理24 h时线粒体膜电位显著降低(P＜0.05).结论:百草枯诱导AML12细胞凋亡过程主要由细胞整体水平的活性氧介导,提示线粒体活性氧并未直接参与百草枯诱导的肝损伤过程.