2个柞蚕诱导型HSP70基因的克隆及热应激表达特征

• 作者: 刘微 姜义仁 孙影 李喜升 李慧君 王勇 秦利 肖红 黄伶
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 柞蚕 热休克蛋白70 基因克隆 序列结构 高温 诱导表达
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 83-91
• 页数: 9页
• 分类号: S885.1|Q785
• 语种: 中文
• DOI: 10.13441/j.cnki.cykx.2016.01.012

摘要

研究柞蚕热休克蛋白基因在高温胁迫下的表达变化,有助于从分子水平解析柞蚕对高温的应激反应机制.采用RT-PCR技术从柞蚕蛹脂肪体组织中克隆了2个热休克蛋白70基因ApHSP70-1(GenBank登录号:KR821069)、ApHSP70-2(GenBank登录号:KT225460),2个基因的开放阅读框(ORF)均为1 905 bp,编码634个氨基酸,蛋白质具有细胞质特征基序,推测为诱导型热休克蛋白,其序列N端为高度保守的ATPase功能域,C端为多肽结合功能域,是差异位点的主要分布区域.ApHSP70-1和ApHSP70-2蛋白之间的序列相似度为86.91％,二者与ApHSC70蛋白序列的相似度分别为71.82％和70.14％.半定量RT-PCR检测显示,高温(43℃)诱导后柞蚕蛹脂肪体组织中ApHSP70-1、ApHSP70-2基因的表达量明显升高,而ApHSC70基因的表达量变化不大;相对于ApHSP70-2,正常环境下ApHSP70-1在柞蚕蛹各组织中几乎不表达,但热激后被诱导表达.qRT-PCR检测高温(43℃)诱导处理后柞蚕蛹脂肪体组织中的ApHSP70-2表达量上调了6.32倍,ApHSP70-1的表达量上调了4.18倍.推测克隆的2个ApHSP70基因在柞蚕应对热激胁迫的反应中发挥重要作用.