miR-200b靶向DNMT3A抑制非小细胞肺癌细胞增殖与诱导凋亡

• 作者: 张军 林称意 罗卫民 罗湘玉 郭家龙
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 微RNAs 癌,非小细胞肺 细胞增殖 细胞凋亡 miR-200b DNA甲基化转移酶3A
• 年，卷（期）: 2016,（8）
• 所属期刊栏目: 细胞与分子生物学
• 页码范围: 984-988
• 页数: 5页
• 分类号: R734.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.11958/20150421

摘要

目的：探讨miR-200b是否通过靶向调控DNMT3A抑制人非小细胞肺癌A549细胞增殖与诱导凋亡。方法运用qRT-PCR检测miR-200b在不同非小细胞肺癌细胞株中的表达；将miR-200b mimics、scramble、DNMT3A-siRNA、control-siRNA分别转染于A549细胞，其中scramble与control-siRNA分别作为miR-200b mimics与DNMT3A-siRNA的阴性对照组。采用Western blot检测A549细胞中DNMT3A蛋白表达；采用MTT与AnnexinV-FITC/PI染色法分别检测A549细胞的增殖与凋亡，比较miR-200b mimics与DNMT3A-siRNA对A549细胞增殖与凋亡的影响。结果 qRT-PCR结果显示，miR-200b在非小细胞肺癌A549、H1299、L78、H460细胞中的表达均明显低于正常人支气管上皮16HBE细胞，其中以A549细胞下调最为明显（P<0.05）。Western blot结果显示，外源过表达miR-200b或沉默DNMT3A能明显下调A549细胞中DNMT3A蛋白的水平。MTT结果显示，转染miR-200b mimics或沉默DN?MT3A 48 h、72 h、96 h后，反映细胞增殖的光密度（OD）值与各自阴性对照组比较明显减小（P<0.05）。AnnexinV-FITC/PI染色结果显示，转染miR-200b mimics或沉默DNMT3A后，A549细胞的凋亡率分别为（23.33%±0.90%、20.41%±0.70%）均高于各自阴性对照组（5.28%±0.55%、5.68%±0.47%，P<0.05）。结论 miR-200b通过下调DNMT3A抑制人非小细胞肺癌细胞增殖与诱导凋亡。