人乳头瘤病毒L2蛋白的病毒样颗粒疫苗研究

• 作者: 宇学锋 朱涛 李军强 杨鸣鸣 蒋蓉 邵忠琦
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人乳头瘤病毒 L2抗原 乙肝病毒核心抗原 病毒样颗粒 免疫原性 中和抗体
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 生物治疗
• 页码范围: 366-371
• 页数: 6页
• 分类号: R373.9|R392-33
• 字数: 5167字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2016.03.016

摘要

目的：构建乙肝病毒核心抗原（ HBcAg）与人乳头瘤病毒（ HPV） L2抗原的融合蛋白，在大肠杆菌中重组表达形成病毒样颗粒结构；通过小鼠模型检测HBc－L2融合蛋白的免疫原性，并研究免疫后获得的小鼠血清对HPV假病毒的中和效力。方法：通过DNA合成构建16型人乳头瘤病毒L2基因片段与HBcAg基因的融合基因，将其克隆至表达载体pET9a并在大肠杆菌中进行HBc－L2融合蛋白表达；将经纯化、鉴定后的融合蛋白免疫BALB／c小鼠，用间接ELISA方法检测小鼠血清中针对L2抗原的抗体效价，并分别研究小鼠血清对16型和18型HPV假病毒的中和效力。结果：HBc－L2融合基因经大肠杆菌系统表达形成可溶性蛋白，经硫酸铵沉淀和CL－4 B凝胶分离纯化后获得纯度＞80％的HBc－L2蛋白；分子筛高效液相色谱－多角度激光光散射（ SEC－MALS）联用技术和透射电子显微镜的分析结果表明，HBc－L2融合蛋白在表达过程中自动组装形成稳定的病毒样颗粒；将纯化后的HBc－L2蛋白免疫BALB／c小鼠可获得针对L2抗原的高滴度抗体，且小鼠血清具有中和16和18型两种假病毒的中和抗体活性。结论：HBc－L2病毒样颗粒可以有效地增强L2抗原的免疫原性，并可刺激机体产生针对多型HPV的免疫保护力，是一个具有潜力的新型广谱HPV疫苗。