氯化锂激活Wnt/β-catenin信号通路致小鼠造血干/祖细胞衰老及其机制

• 作者: 夏婕妤 张岩岩 张梦思 景鹏伟 李静 王璐 贾道勇 陈粼波 陈雄斌
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 医学
• 关键词: 造血干/祖细胞 氯化锂 衰老 Wnt/β-catenin信号通路 免疫印迹法 小鼠
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 细胞和分子生物学
• 页码范围: 34-41
• 分类号: R329.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2016.01.007

摘要

目的 探讨氯化锂(LiCl)激活Wnt/β-catenin信号通路致小鼠Sca-1+造血干/祖细胞(Sca-1+ HSC/HPC)衰老及其机制.方法 免疫磁珠法分离纯化小鼠Sca-1+ HSC/HPC.纯化后细胞分为:正常对照组,常规培养;LiCl组,正常对照组基础上,加入LiCl(终浓度10mmol/L);D-半乳糖致衰组,正常对照组基础上,加入D-半乳糖(终浓度166mm0l/L),各组培养48h.造血祖细胞混合集落(CFU-Mix)培养检测Sca-1+ HSC/HPC多向分化潜能,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测Sca-1+ HSC/HPC增殖能力,衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测细胞衰老,免疫细胞化学染色和Western blotting检测细胞内β-catenin、糖原合成激酶3β(GSK-3β)、P53、P21蛋白表达,ELISA检测细胞胞质内8羟基脱氧鸟苷(8-OH-dG)含量.结果 与正常对照组相比,LiCl组与D-半乳糖致衰组Sca-1+ HSC/HPC增殖能力下降,形成CFU-Mix数量下降,SA-β-Gal染色阳性细胞百分率增加,β-catenin、P53、P21蛋白表达上调,GSK-3β蛋白表达下调,细胞内8-OH-dG水平升高.结论 LiCl可通过激活Wnt/β-catenin信号通路,使细胞DNA氧化损伤,上调P53/P21途径,这可能是导致小鼠造血干/祖细胞衰老的机制之一.