小檗碱对冈田酸诱导HT22细胞损伤的保护作用

• 作者: 叶茂盛 张霞 段文彪 肖春苟 蒋威
• 来源期刊: 解剖学研究
• 关键词: 小檗碱 HT22小鼠海马神经元 氧化应激 凋亡 神经保护
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 261-268
• 页数: 8页
• 语种: 中文

摘要

目的 本实验以冈田酸(OA)损伤的HT22细胞作为氧化应激损伤的体外模型,探讨小檗碱对OA氧化应激损伤作用的影响及其机制.方法 应用CCK-8法检测不同浓度冈田酸(0、20、40、60、80、160 nmol/L)损伤HT22细胞12h后的细胞活力;不同浓度小檗碱(2.5、5.0、10.0、20.0 μmol/L)预处理HT22细胞12 h后加入OA损伤12 h,应用CCK-8比色法检测细胞的增殖状况;倒置显微镜下观察细胞形态学变化;应用试剂盒对细胞丙二醛(MDA)和抗氧化酶(SOD-1和GSH-Px)活性的进行测定;2',7'-dichlorfluorescein-diacetate(DCFH-DA)染色检测HT22细胞内ROS水平;Western blot法检测Cleaved caspase-3蛋白的表达.结果 OA(0～160 nmol/L)处理HT22细胞12h后,细胞活力分别为(100.00±0.42)％、(91.96±1.18)％、(72.79±1.51)％、(57.89±3.18)％、(41.50±1.58)％、(33.83±1.59)％,细胞活力呈浓度依赖性下降;小檗碱(2.5～20.0μmol/L)预处理细胞12h后,再给予OA作用12h,细胞活力由OA单独损伤组(76.48±3.94)％,分别上升至(89.18±3.38)％、(97.06±5.56)％、(94.85±3.16)％、(87.52±4.81)％;小檗碱(5.0、10.0 μmol/L)预处理组,减少了MDA的产生,抑制了细胞内ROS的积聚,提高了抗氧化酶(SOD-1和GSH-Px)活性,下调了Cleaved caspase-3蛋白表达.结论 小檗碱可以通过对抗OA诱导的HT22细胞氧化应激损伤和凋亡发挥其神经保护作用.