大鼠脑缺血再灌注损伤后重组人粒细胞集落刺激因子对AKT/caspase9信号通路的影响

• 作者: 马静萍 黄姗姗
• 来源期刊: 中华临床医师杂志（电子版）
• 关键词: 再灌注损伤 粒细胞集落刺激因子,重组 细胞凋亡 丝/苏氨酸蛋白激酶 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶?
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 页码范围: 819-825
• 页数: 7页
• 字数: 5245字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.1674-0785.2016.06.016

摘要

目的：探讨大鼠脑缺血再灌注损伤后重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）的神经保护作用机制及动态观察p-AKT、caspase9、caspase3蛋白表达变化。方法74只成年雄性SD大鼠，随机分为四组：假手术组、模型组、治疗组、观察组。采用 longa 线栓法制作大脑中动脉闭塞再灌注模型（MCAO/R），治疗组于再灌注时及之后每6 h腹腔注射50μg/kg rhG-CSF，模型组和假手术组同时间给予等量的生理盐水，采用longa 5分制法行神经功能缺损评分，光镜下观察缺血区病理学变化，运用免疫组化及Western blot蛋白印迹测定p-AKT、caspase9、caspase3蛋白表达，用原位末端转移酶标记（TUNEL）法检测细胞凋亡情况。结果（1）再灌注24 h时，假手术组未见神经功能缺损，模型组神经功能缺损评分（2.25±0.62）高于治疗组（1.58±0.67，P=0.022）；免疫组化及Western blot测定p-AKT、caspase9蛋白表达结果一致，与假手术组相比，模型组和治疗组p-AKT、caspase9蛋白表达均增加（P＜0.01），治疗组p-AKT蛋白表达较模型组升高（P＜0.01），模型组caspase9蛋白表达比治疗组升高（P＜0.01）；假手术组偶见凋亡细胞，模型组凋亡细胞比例[（31.80±2.91）%]较治疗组[（22.13±2.74）%]显著增多。（2）观察组：再灌注后不同时间点（2 h、6 h、24 h、48 h、72 h）p-AKT、caspase9及caspase3蛋白表达不同。结论 rhG-CSF可能对大鼠脑缺血再灌注损伤有保护作用，其机制可能通过AKT/caspase9信号通路减少神经细胞凋亡。