一种针对马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)的无痕基因组改造方法

• 作者: 余垚 吕红 周峻岗 郭超 陈勇毅
• 来源期刊: 复旦学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 马克斯克鲁维酵母 多基因敲除 KmURA3基因 KmHIS3基因 KmADE2基因
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 微生物学
• 页码范围: 576-586
• 分类号: Q93-31
• 语种: 中文

摘要

马克斯克鲁维酵母位于酵母科克鲁维属,具有高分泌能力、高生长速率、多底物利用以及耐高温等特点,具有工业应用前景.因此,建立马克斯克鲁维酵母的基因工程改造技术十分重要.本文以马克斯克鲁维酵母URA3基因缺陷菌株为出发菌株,依据同源重组原理,选用KmURA3作为可循环使用的筛选标签基因,建立了一种针对马克斯克鲁维酵母的无残留多基因敲除技术,以满足其遗传工程改造的需求.本研究利用这种技术成功构建了Kmhis3△、Kmura3 △his3△、Kmura3 △ade2△、Kmura3△his3 △ade2△、Kmhis3 △ade2△等5株营养缺陷型菌株,为马克斯克鲁维酵母的分子遗传学研究以及工业应用研究提供了遗传材料.