深海细菌太平洋火色杆菌中α-淀粉酶基因 amy608的克隆表达及其酶学性质研究

• 作者: 商谢谢 曾润颖 蔡亚萍 金敏
• 来源期刊: 应用海洋学学报
• 学科: 地球科学
• 关键词: 海洋生物学 太平洋火色杆菌 α-淀粉酶 中温稳定性 深海
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 论文与报告
• 页码范围: 130-137
• 页数: 8页
• 分类号: P735
• 字数: 6271字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/J.ISSN.2095-4972.2016.01.016

摘要

从来自深海沉积物的太平洋火色杆菌（Flammeovirga pacifica）的基因组中发现了一个全长为1875 bp 的α-淀粉酶基因 amy608．该基因在数据库中找不到具有同源性的序列，而所编码的Amy608蛋白与已注册蛋白的氨基酸序列相似性最高仅为56％，但具有α-淀粉酶水解活性所必需的保守基序 DXEXD．进化树分析表明其属于糖苷水解酶13（GH13）家族第二亚家族．构建了pColdΙ-amy608表达载体，在大肠杆菌中进行重组 Amy608蛋白的异源表达，并采用镍离子亲和层析柱对重组蛋白进行了纯化．酶学性质分析表明，重组酶 Amy608的最适作用温度为40℃，在40℃保温4 d 后，仍保留70％以上的酶活，显示出良好的中温热稳定性；最适 pH 值为7.0，pH 值范围在6～9时仍保留60％以上的酶活力，表明该酶具有较宽的 pH 值作用范围．Ca2＋、Na ＋、K ＋对α-淀粉酶 Amy608有激活作用，尤其是 Ca2＋可使酶活显著提高40％．薄层色谱分析结果显示该酶水解可溶性淀粉的最终产物以葡萄糖为主，表明该酶是一个糖化型淀粉水解内切酶．这些结果表明Amy608为 GH13家族第二亚家族中一个新型的α-淀粉酶．

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡亚萍	厦门出入境检验检疫局检验检疫技术中心	1	2	1.0	1.0