长松萝中非核糖体肽合成酶NRPS基因克隆与鉴定

• 作者: 原晓龙 张传光 毕玮 王娟 王毅 陈剑
• 来源期刊: 西部林业科学
• 学科: 医学
• 关键词: 长松萝 NRPS 基因克隆 生物信息学分析 分子系统进化分析 诱导表达
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 页码范围: 14-20,24
• 页数: 8页
• 分类号: R284|R285
• 字数: 5215字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16473/j.cnki.xblykx1972.2016.01.002

摘要

非核糖体肽具抗生素、抗病毒、抗癌及免疫抑制剂等重要的药用价值.以长松萝的地衣型真菌为研究材料,通过同源克隆和Gene walking的方法获取长松萝地衣型真菌全长非核糖体肽合成酶基因(UsNRPS),并对得到的UsNRPS进行生物信息学分析、分子系统进化分析及基因表达分析.结果表明:在地衣型真菌中,非核糖体肽在长松萝中为首次发现,BLAST比对表明其为NRPS基因的A结构域,生物信息学分析显示UsNRPS蛋白是一种非分泌蛋白,位于细胞质基质中;分子进化分析显示UsNRPS与埃默森蓝状菌(Rasamsonia emersonii)的NRPS基因的A结构域蛋白聚为一类;RT-PCR分析表明:2％肌醇、10％甘露醇、2％山梨醇、2％葡萄糖、10％葡萄糖、0.2％谷氨酰胺、1％甘氨酸、0.2％丙氨酸能够诱导NRPS基因的轻微表达,2％、10％蔗糖和果糖均能诱导NRPS基因的强烈表达;0.2％、1％的天冬氨酸均抑制NRPS基因的诱导表达.