家蚕核型多角体病毒Bm90基因缺失对病毒增殖和组装的影响

• 作者: 于威 吴银丽 巩成见 田星 童富淡 舒建洪 蒋磊
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 家蚕核型多角体病毒 Bm90基因 λRed重组系统 Bac-to-Bac系统 病毒增殖 病毒组装
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 458-465
• 页数: 8页
• 分类号: Q786|Q527+.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.13441/j.cnki.cykx.2016.03.011

摘要

家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)基因组中的orf90基因(Bm90)是一个未知功能的保守基因.利用λRed重组系统和Bac-to-Bac系统构建野生型病毒WtBacmid-polh-egfp、Bm90基因缺失型病毒Bm90ko-polh-egfp-Bacmid及Bm90基因补回型病毒Bm90re-polh-egfp-Bacmid,并制备Bm90蛋白的多克隆抗体,研究Bm90基因在病毒感染周期中的表达以及对病毒增殖和组装的影响.将3种重组病毒分别转染BmN细胞,Western blot检测显示Bm90蛋白在病毒转染BmN细胞后72 h有表达;但用荧光显微镜观察Bm90基因缺失型病毒转染的BmN细胞中没有出现绿色荧光,且检测其病毒滴度为0;用透射电子显微镜观察在Bm90基因缺失型病毒转染的BmN细胞中没有子代病毒粒子出现.研究结果表明,Bm90基因缺失会抑制子代病毒粒子的组装和产生,使病毒失去侵染性,Bm90基因是病毒增殖及组装的必需基因.