农杆菌介导烟草抗真菌β-1，3-葡聚糖酶基因转化洋桔梗

• 作者: 乔宁宁 付晓佳 张倩 李琳 王转梅 陈崇顺
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 洋桔梗 β-1,3-葡聚糖酶基因 农杆菌介导法 灰霉病抗性
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 遗传育种?生理生化
• 页码范围: 44-50
• 页数: 7页
• 分类号: Q789
• 字数: 5318字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2016.01.007

摘要

为获得洋桔梗抗真菌病害新品种，本研究将烟草抗真菌β?1，3?葡聚糖酶基因（ Glu）与质粒pBI121重组，构建了植物表达载体pBI121?Glu，利用农杆菌介导法转化洋桔梗品种Double Mariachi Pink叶块，共获得21个卡那霉素抗性株系。对抗性株系进行PCR扩增，获得10个阳性株系。选取其中生长良好的5个株系进行RT?PCR检测，鉴定出3个株系（ EG6、EG11和EG17）为转基因正常转录株系。 EG6、EG11和EG17株系及非转基因对照株系的β?1，3?葡聚糖酶的平均活力分别为0?301 U、0?243 U、0?401 U及0?236 U，其中EG6和EG17株系的平均活力显著高于非转基因对照株系。洋桔梗离体叶片的抗灰霉病鉴定显示，EG17病斑面积（0?432 cm2）显著小于非转基因对照株系（2?156 cm2）。此外，EG17对灰霉病的抗性还表现为发病延迟、病斑面积扩大速度减慢等。