Akt1原核表达载体GST-Akt1的构建及鉴定

• 作者: 叶棋浓 夏静霖 张春霞 程龙 营孙阳 麦宏旭
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: Akt1 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 371-373
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 1738字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2016.03.016

摘要

目的:构建带GST标签的Akt1原核表达载体,获得GST-Akt1原核表达蛋白,并进行体外激酶实验验证其能否发生磷酸化修饰.方法:以乳腺文库为模板,采用PCR技术扩增出Akt1编码序列,将其插入pGEX-KG载体,鉴定正确后转化大肠杆菌Rossate诱导表达,纯化蛋白后进行体外激酶实验,检测得到的蛋白是否可以发生磷酸化修饰.结果:双酶切和测序结果表明GST-Akt1原核表达质粒构建成功,考马斯亮蓝染色结果表明GST-Akt1蛋白获得表达,体外激酶实验表明GST-Akt1蛋白可发生磷酸化修饰.结论:构建了带GST标签的Akt1原核表达载体,为进一步研究Akt1磷酸化发生和调节的机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张春霞	军事医学科学院生物工程研究所	12	59	4.0	7.0
2	程龙	军事医学科学院生物工程研究所	26	79	4.0	8.0
3	营孙阳	军事医学科学院生物工程研究所	5	19	1.0	4.0
4	麦宏旭		2	0	0.0	0.0
8	夏静霖	军事医学科学院生物工程研究所	1	0	0.0	0.0