尼罗罗非鱼肌肉蛋白质双向电泳体系的建立

• 作者: 岑剑伟 张红杰 李娜 李来好 杨贤庆 赵永强 郝淑贤 魏涯
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 尼罗罗非鱼 肌肉蛋白质 双向电泳 蛋白质组学
• 年，卷（期）: 2016,（10）
• 页码范围: 1648-1656
• 分类号: S917.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20151010109

摘要

为建立1种尼罗罗非鱼肌肉组织蛋白质的双向电泳体系,实验将尼罗罗非鱼肌肉组织蛋白质提取后,用双向电泳(2-DE)分离蛋白质,分别对蛋白质样品的制备方法、IPG胶条长度及pH范围、SDS-PAGE凝胶浓度及染色方法4个关键因素进行了探索和优化.结果显示,采用液氮研磨-丙酮沉淀法制备样品蛋白质,使用24 cm pH 4～7的IPG胶条进行第一向等电聚焦电泳,第二向SDS-PAGE电泳采用浓度为12.5％的凝胶进行,双向电泳后的凝胶采用硝酸银染色法进行染色处理,该条件下扫描所得尼罗罗非鱼肌肉蛋白质二维电泳图谱具有蛋白质分离程度好、斑点清晰、分辨率高及横纹少等优点.研究表明,技术体系适用于尼罗罗非鱼肌肉蛋白质的分离,可用于后续罗非鱼肌肉蛋白质组学研究.