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摘要:
目的:构建磷酸化AKT1 (Ser473)位点突变真核表达载体,并检测PI3K/AKT/NF-κB信号通路轴对胃癌细胞增殖的影响.方法:以带有pcDNA3.0-Flag标签的AKT1质粒为模板,扩增出AKT1 (Ser473A)(丝氨酸突变成丙氨酸)位点突变编码序列,将其插入pcDNA3.0-Flag载体中,双酶切和测序验证后瞬时转染人胚肾293T细胞,Western印迹检测其表达情况;将突变质粒与空载体分别转染胃癌细胞HGC-27,通过Western印迹检测其下游基因核转录因子κB(NF-κB)在蛋白水平的变化;通过CCK-8法检测对细胞生长曲线的影响.结果:双酶切和测序结果表明,pcDNA3.0-Flag-AKT1 (Ser473A)真核表达质粒构建成功;转染293T细胞后获得表达;转染胃癌细胞HGC-27后,Western印迹验证去磷酸化AKT1 (Scr473A)可下调NF-κB的蛋白水平(P<0.01);细胞生长曲线结果显示,转染pcDNA3.0-Flag-AKT1 (Ser473A)较空载体细胞生长慢(P<0.01).结论:PI3K/AKT/NF-κB信号通路轴在胃癌发生发展过程中发挥重要作用.
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miR-124
人胃癌MGC803细胞
细胞增殖
细胞凋亡
PI3K/Akt信号通路
内容分析
关键词云
关键词热度
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文献信息
篇名 PI3K/AKT/NF-κB轴调控胃癌细胞HGC-27增殖
来源期刊 生物技术通讯 学科 生物学
关键词 AKT NF-κB 位点突变 胃癌
年,卷(期) 2016,(3) 所属期刊栏目 研究报告
研究方向 页码范围 367-370
页数 4页 分类号 Q78
字数 2411字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1009-0002.2016.03.015
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 叶棋浓 军事医学科学院生物工程研究所 138 519 11.0 17.0
2 卫勃 解放军总医院普通外科 76 545 13.0 19.0
3 刘文忠 7 9 2.0 3.0
4 熊加秀 内蒙古医科大学基础医学院 3 4 1.0 2.0
传播情况
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研究主题发展历程
节点文献
AKT
NF-κB
位点突变
胃癌
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
生物技术通讯
双月刊
1009-0002
11-4226/Q
16开
北京丰台东大街20号
82-196
1989
chi
出版文献量(篇)
4313
总下载数(次)
22
相关基金
北京市科技新星计划
英文译名:
官方网址:http://www.lawol.org/difang/0611112652058_0_7649.html
项目类型:
学科类型:
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
期刊文献
论文1v1指导