人源抗转铁蛋白受体单链抗体的筛选及其构建与表达

• 作者: 佟振华 刘蕴慧 宋海峰 崔新玲 张晶 钱尼良 高新
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 转铁蛋白受体 抗体库 单链抗体
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 358-361
• 页数: 4页
• 分类号: R392.1
• 字数: 3231字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2016.03.013

摘要

目的:在人源单链抗体库中筛选抗人转铁蛋白受体(TfR)单链抗体(scFv).方法:人源展示型抗体库质粒转染293T细胞,通过第一轮流式细胞分选得到比例为0.2％的阳性细胞,提取质粒并扩增,得到的质粒转染293T细胞作为下一轮筛选所需抗体库;第二轮分选时降低抗原浓度,最后得到2个候选的scFv序列.经序列分析,选择1号单链抗体基因,利用基因工程技术构建分泌型表达质粒,转染293E细胞并通过镍亲和层析纯化获得单链抗体蛋白,经ForteBio Octet进一步测定单链抗体蛋白的亲和力.结果:经过2轮筛选获得了全新的抗TfR单链抗体序列,构建并表达了该单链抗体蛋白,该单链抗体与TfR的亲和力常数为5.57×10-7.结论:从展示型人源scFv抗体库中获得了全新的抗TfR单链抗体,该单链抗体与TfR具有较好的亲和力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋海峰	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	66	327	9.0	15.0
2	高新	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	25	142	7.0	10.0
3	佟振华	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	1	2	1.0	1.0
7	钱尼良	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	1	2	1.0	1.0
8	张晶	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	11	67	5.0	8.0
9	崔新玲	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	1	2	1.0	1.0
10	刘蕴慧	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	4	5	2.0	2.0