重组骆驼源单域抗体的原核表达及纯化

• 作者: 刘超 宁保安 彭媛 高志贤
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 骆驼源单域抗体 原核表达 纯化
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 354-357
• 页数: 4页
• 分类号: Q78|R392.1
• 字数: 3610字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2016.03.012

摘要

目的:原核表达重组骆驼源单域抗体并纯化.方法:将雌二醇特异性的单域抗体基因片段克隆到pET32a载体中,经IPTG诱导表达后对形成的包涵体进行纯化,利用间接ELISA法检测获得的单域抗体的活性,并以孕酮、雌酮和雌三醇为对照,鉴定雌二醇单域抗体的特异性.结果:重组雌二醇单域抗体的相对分子质量约为34×103,通过大肠杆菌BL21(DE3)-pET32a构建的原核表达体系实现了雌二醇单域抗体的高水平表达,并通过包涵体纯化获得了可溶性的高纯度单域抗体抗体,经间接ELISA检测,该雌二醇特异性抗体的50％抑制浓度(IC50)为20.03 ng/mL,对孕酮和雌酮2种化合物的交叉反应率分别为29.78％和1.63％,特异性较好.结论:通过构建原核表达体系,可以获得功能性的骆驼源单域抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宁保安	军事医学科学院卫生学环境医学研究所天津市环境与食品安全风险监控技术重点实验室	34	101	5.0	8.0
2	高志贤	军事医学科学院卫生学环境医学研究所天津市环境与食品安全风险监控技术重点实验室	135	1451	21.0	32.0
3	刘超	军事医学科学院卫生学环境医学研究所天津市环境与食品安全风险监控技术重点实验室	24	191	8.0	13.0
4	彭媛	军事医学科学院卫生学环境医学研究所天津市环境与食品安全风险监控技术重点实验室	11	17	2.0	3.0