抗羊口疮病毒ORFV118蛋白单克隆抗体的制备、鉴定及其应用

• 作者: 廖小青 杜政伦 罗树红 肖斌 郝文波
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 农学
• 关键词: 羊口疮病毒 ORFV118 单克隆抗体 早期蛋白 诊断
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 292-297
• 页数: 6页
• 分类号: S852.65+4
• 语种: 中文

摘要

制备抗羊口疮病毒118(ORFV118)重组蛋白的单克隆抗体并鉴定其生物学特性.构建ORFV118原核表达重组质粒pET33b-ORFV118,将重组质粒转化大肠杆菌BL21,诱导表达出ORFV118重组蛋白;利用Ni-NTA亲和层析法纯化ORFV118重组蛋白;以纯化蛋白为抗原免疫小鼠,通过杂交瘤技术制备单克隆抗体;利用间接ELISA法、Western blot、免疫组化等方法分别对单抗特异性、效价、亚型以及ORFV118蛋白的功能进行研究.获得了3株稳定分泌单克隆抗体的细胞株,分别命名为1A2,385,5D10,它们诱生的小鼠腹水效价分别为1∶10 000,1∶6 400,1∶8 000.其中效价最高的1A2抗体亚型为IgG1,能特异性结合其免疫原蛋白、真核表达产物以及病羊皮肤组织中的ORFV118蛋白.免疫组化结果显示单抗1A2染色局限于皮肤表皮层角化细胞及浸润至皮下组织的炎症细胞,与病毒侵染上皮组织层的特性相符.制备的单抗1A2能特异性识别ORFV118.深入研究单抗1A2将为了解ORFV118的生物学特性,为羊传染性脓疱病的诊断、预防与治疗提供可能和新思路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郝文波		44	69	4.0	5.0
2	廖小青		7	13	2.0	3.0
3	罗树红		16	33	3.0	5.0
4	肖斌		7	39	3.0	6.0
5	杜政伦		1	0	0.0	0.0