利用酵母双杂交系统筛选雷竹 SOC1相互作用蛋白

• 作者: 徐英武 施泉 曹友志 林新春 潘现飞
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 雷竹 SOC1 cDNA 文库 酵母双杂交 蛋白质互作
• 年，卷（期）: 2016,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 207-213
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.08.030

摘要

在雷竹（Phyllostachys violascens）中找到 SUPPRESSOR OF OVEREXPRESSION OF CONSTANS1（SOC1）在开花途径中的作用靶标，进一步探索 SOC1的作用机制。构建 pGBKT7-PvSOC1诱饵表达载体，通过 SMART 技术构建开花时期的雷竹 cDNA文库，酵母双杂交筛选与 SOC1互作的蛋白，并对其进行分析鉴定。结果显示，成功构建了可用于酵母双杂交的 cDNA 文库，文库的转化率为每微克 pGADT7-Rec 3.0×106转化子，文库滴度为7.5×106 cfu/mL，插入片段主要在250-2000 bp 之间。通过酵母双杂交实验得到与诱饵蛋白 PvSOC1相互作用的蛋白，筛选到的靶标蛋白经鉴定是一个富含亮氨酸的蛋白激酶，特征氨基酸序列在不同物种中非常保守，与水稻中的同源蛋白亲缘性最高。