牛呼吸道综合症多重PCR检测方法的建立

• 作者: 吴丹丹 周玉龙 周金玲 朴范泽
• 来源期刊: 黑龙江八一农垦大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牛呼吸道综合症 病毒 mRT-PCR
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 牛场群发病防控
• 页码范围: 97-101,107
• 页数: 6页
• 分类号: S855.3
• 字数: 3911字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2090.2016.06.020

摘要

为了建立针对BRDC常见的主要病原牛黏膜病病毒(BVDV)、牛副流感病毒3型(BPIV-3)和牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)的一步法多重RTPCR,引入了新型的具有反转录酶和DNA聚合酶活性的rTth DNA聚合酶,通过对退火温度和引物浓度的优化,敏感性和特异性的检测,最终确定最佳退火温度为54.5℃,最佳引物浓度为0.6 uM.对BHV-3、BRSV和BVDV的最小检测量分别为162、16和21个TCID50/0.1 mL.与牛传染性鼻气管炎病毒、冠状病毒、腺病毒,以及多杀性巴氏杆菌、肺炎链球菌、化脓隐秘杆菌、溶血性曼氏杆菌等没有交叉反应.建立起的mRT-PCR检测方法可用于鼻腔分泌物的检测,为进一步mRT-PCR试剂盒的组装奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朴范泽	黑龙江八一农垦大学动物科技学院预防兽医重点实验室	87	746	16.0	22.0
2	周玉龙	黑龙江八一农垦大学动物科技学院预防兽医重点实验室	64	267	8.0	13.0
3	吴丹丹	黑龙江八一农垦大学动物科技学院预防兽医重点实验室	13	62	5.0	7.0
4	周金玲	黑龙江八一农垦大学动物科技学院预防兽医重点实验室	4	15	3.0	3.0